掌握DMEM培养基的正确配置与使用，为细胞培育保驾护航
在生命科学研究中，细胞培养是不可或缺的一环，而培养基则是细胞生长的摇篮。其中，DMEM培养基因其优越的营养成分和适应性，被广泛应用于各类细胞培养实验。为确保细胞的健康生长，我们必须严格遵循以下步骤和注意事项来配置和使用DMEM培养基。
配置步骤：
1. 准备阶段：保持实验区域的整洁至关重要。使用酒精棉球擦拭超净台操作区域，为配置培养基做好无菌准备。随后，备好所需的试剂和器材，如DMEM培养基、胎牛血清（FBS）、双抗以及50ml离心管等。
2. 精确配比：根据实验需求，量取适量的DMEM培养基，并加入适量的胎牛血清和双抗。通常，FBS的终浓度控制在10%至20%之间，双抗的浓度通常为1%。在混合这些成分时，需确保均匀，避免任何污染。
3. 过滤灭菌：使用0.22μm的过滤器对配置好的培养基进行过滤，以消除细菌和真菌的污染风险。
4. 妥善储存：将培养基分装到无菌的试管或离心管中，并贴上明确的标签。为确保培养基的活性，应存放在4℃的冷藏环境中。
使用步骤：
1. 预热准备：在使用前，将新鲜的培养基预热至37℃，以维持细胞的最佳生长环境。
2. 细胞传代处理：当细胞生长至80%至90%汇合时，是进行传代的最佳时机。使用胰蛋白酶帮助细胞脱落，并在细胞从培养瓶表面完全脱落后，用DMEM培养基中和胰蛋白酶。接着，将细胞悬液离心，去除上清液后，用新鲜的培养基重新悬浮细胞，并接种到新的培养瓶中。
3. 维持适宜的培养条件：将接种好的细胞放入含有37℃温度和5% CO₂的环境中，以确保细胞的稳定生长。
注意事项：
在配置和使用过程中，必须确保所有试剂和器材的无菌状态，这是避免细胞污染的关键。
定期检查培养基的颜色，以判断其pH值是否稳定。若培养基颜色变黄，可能意味着pH值偏低，需要及时更换。
避免低温冻存培养基，长期保存应在2-8℃的阴凉处避光保存。
在细胞培养过程中，应定期观察细胞的形态和生长状态，并详细记录，这对于后续实验至关重要。
遵循上述步骤和注意事项，我们可以为细胞营造一个理想的生长环境，确保实验的顺利进行。
